Лабораторний аналіз Endoca

Канабіноїдний аналіз

Аналіз проводився за допомогою системи Shimadzu HPLC, оснащеної терморегулятором SIL 30AC, вакуумним DGU 20A5 і насосом LC-30AD. Хроматографічний поділ був отриманий за допомогою колонки Supelco Discovery HS C18 (25 x 4,6 мм, 5 мкм) RP разом з використанням попередньої колонки C18 при 30 °C, керованої піччю опалення CTO-20AC. Ізократична елютія (ацетонітрил: вода (0,5% ФА) (4: 1)) використовувалася за 30 хвилин. Витрата становила 0,8 мл/хв. Канабіноїди CBD і CBDA контролювалися на довжинах хвиль 225 і 306 нм за допомогою детектора діодів SPD-M20A. Концентрація нормативів становила 1 мг/мл при об'єкції 20 мкл. Оцінка даних проводилася за допомогою програмного забезпечення Solutions Lab. Кількісний аналіз досліджуваних канабіноїдів оцінювався за допомогою опорної кривої для кожного з'єднання. Діапазон калібрування був лінійним для концентрацій від 5 до 500 нг /мл, для КБР і від 5 до 500 нг/мл для КБР. Терміни зберігання сполук були: CBDA (RT 9,5 хв), КБР (RT 11,1 хв). Екстракт конопель розчиняють в 1 мл метанолу. Потім розчин піддавали УЗД протягом 5 хвилин і перемішували протягом 10 секунд. Зразки перед аналізом HPLC були центрифуговані зі швидкістю 4800 оборотів на хвилину, а потім розбавлені метанолом до кінцевої концентрації 1 мг/мл.

Терпен-аналіз

10 мг однорідного зразка зважили і розчинили в 1 мл пентану, що містить 0,04% декану в якості внутрішнього стандарту. Зразок поміщали на ультразвукову водяну баню на 5 хвилин і перемішували. 200 мкл розчину, приготованого таким чином, розвели 800 мкл пентану і проаналізували методом GC-FID. Для терпен-аналізу використовувалася газова хроматографія (Agilent HP 6890) з виявленням полум'яної іонізації (FID). Хроматографічне відділення здійснювалося за допомогою капілярної колони RRTX-5 w/ Integra-Guard. Ін'єкція на хроматографічну колонку була отримана за допомогою роздільного/безрозщеного дозатора в спліт-режимі (1:10). Аналіз проводився за таких умов: температурна програма: від 50 °C до 280 °C (зростання 15 °C/хв), колона зберігалася в темпі. 280 °C протягом 15 хв, загальний час аналізу 31 хвилина; температура дозатора 280 °C; температура лінії передачі 260 °C; потік гелію через хроматографічну колонку 1 мл/хв. На стовпець було введено зразок 2 мкЛ. Дані були проаналізовані за допомогою Chemstation v.D.02.00.275 (Agilent Technologies).